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清洁分析方法验证中为什么方法回收率合格,而擦拭回收率不合格?

嘉峪检测网        2021-02-04 08:58

清洁分析方法验证包括分析方法和取样方法的验证,通常用擦拭回收试验来证明取样方法的有效性,擦拭回收试验如何做?擦拭溶剂如何选择?为什么方法回收率合格,而擦拭回收率不合格?

 

1 、进行清洁分析方法验证前,需要准备什么?

 

1.1首先,需要知道残留物控制限度。验证部门人员依据设备表面积、产品批量等信息计算出残留物的控制限度,QC人员以此当做100%的浓度。

 

1.2需要知道产品的清洁方法,主要关注使用的清洁溶剂,通常清洁溶剂应该能够有效的溶解该产品的API,并且不能对设备和产品以及其他产品造成污染。

 

1.3选择合适的棉签,原则如下:

 

a. 能被擦拭溶剂很好的湿润

 

b. 有一定的机械强度和韧性,足以对设备表面施加一定的压力和摩擦力,并不易脱落纤维

 

c. 能同擦拭和萃取溶剂相互兼容,不对检测产生干扰

 

d. 质优价量(一定要考虑公司成本)

 

1.4选择与车间生产设备表面材质相同的擦拭板,表面要平整、光滑、干净。

 

2 、如何建立清洁分析方法

 

一般采用实验室已有的色谱条件进行。如可以参考含量或者有关物质的色谱条件进行(方便操作,节约仪器和色谱柱)。

 

3、清洁分析方法验证包括哪些内容?

 

3.1对色谱分析方法验证:专属性、准确度、线性和范围、定量限、检测限、精密度

 

3.2对取样方法进行模拟验证:即所谓的取样效率/取样回收率。实际上是对棉签的选择、擦拭溶剂的选择、取样人员操作、残留物转移到棉签、样品萃取过程的全面考察。

 

4 、清洁溶剂的选择?

分类

部门

用途

选择原则

清洁溶剂

车间

用于产品的清洁

有效溶解残留物、不腐蚀设备、廉价、且本身易被清除。

擦拭溶剂

QC

为QC进行模拟取样时,做擦拭回收率湿润棉签的溶剂

因为是模拟取样,所以QC进行擦拭取样回收率验证时,所用的擦拭溶剂应该和后续QA取样溶剂一样。

1) 溶剂不得在设备上遗留有毒物质(不能污染产品、设备、环境等)

2) 应使擦拭取样有较高的回收率(API溶解性好)

3) 不得对随后的检测产生干扰

4) 价格低廉(考虑公司成本)

稀释剂

QC

用于稀释样品的溶剂

考虑供试品的溶解性、不能对检测产生干扰等等。

可以和擦拭溶剂相同,也可以和擦拭溶剂不同

取样溶剂

QA

用于产品清洁后,取样时湿润棉签的溶剂

取样溶剂应该与擦拭回收率试验中用到的溶剂一致。不应该对产品和生产线造成二次污染,口服固体制剂的取样溶剂一般为水或者无水乙醇。

 

5 、擦拭回收试验如何合理进行?

 

通常制备3个浓度(2LOQ、100%、200%)的待测溶液,均匀涂布在10*10cm2范围内(每个浓度涂布2-3份),采用烘干或者自然晾干的方式使其干燥,不同的2-3个人使用相同的棉签蘸取擦拭溶剂,采用相同的擦拭方法进行擦拭回收试验,计算回收率。

 

6 、为什么要制备3个不同浓度?

 

因为擦拭回收试验主要是模拟设备残留物较少(低于清洁限度)和较多(高于清洁限度)时,取样方法的有效性。

 

7 、最低浓度为什么是2LOQ,而不是LOQ?

 

因为擦拭回收率受到取样和检验的双重影响,所以一般要求擦拭回收率大于50%或60%,如果最低浓度不是2倍的LOQ,可能会出现0.5-0.6倍的LOQ,低于LOQ就不能准确定量,所以为2倍(实际有可能是1.0-1.2倍)

 

8、 为什么需要2-3个不同人员进行试验?

 

擦拭回收率试验目的是考察不同取样人员采用相同取样方法,但是可能会受到擦拭力度、棉签与设备接触角度不同等影响而导致取样效果的差异,所以需要不同人员进行。

 

9 、为什么擦拭溶剂一定要和取样溶剂一样?

 

因为擦拭回收试验的目的模拟取样,证明取样方法的有效性和重现性,所以擦拭溶剂要和取样溶剂一致。并且擦拭/取样溶剂不能污染产品,不能干扰检测。

 

10 、擦拭/取样溶剂应该如何选择?

 

选择擦拭/取样溶剂时,需要综合生产工艺(使用到的溶剂等)、溶解性、溶剂的毒害性、避免引入污染物、企业成本等因素进行评估。擦拭/取样溶剂不能对产品/设备造成污染,不能引入有毒害的有机溶剂或污染物。生产过程中通常不能使用有毒害的有机溶剂(如必须使用,则需要经过合理的风险评估,同时控制有机溶剂残留量)。例如,固体口服制剂常见在湿法制粒或包衣时使用到乙醇(三类溶剂,低毒、对人类健康危害风险较低的溶剂)。基于以上原则,口服固体制剂常用水、乙醇或者二者的混合物作为清洗溶剂,故擦拭/取样溶剂也只能选择乙醇、水或者二者的混合物,如果使用其他溶剂,则需要进行风险评估,同时控制溶剂残留量。

 

11 、擦拭回收试验的可接受标准是什么?

 

药品生产验证指南中一般不低于50%,业内常见不低于60%。

 

12、 回收率不符合要求的主要原因有哪些?

 

a. 擦拭溶剂选择不合适

 

b. 人员的擦拭力度(均匀用力)、擦拭速度(要快,防止溶剂挥发)影响

 

c. 擦拭路径(要在涂布的10*10 cm2区域内)

 

d. 棉签与板的接触角度太大,导致接触面积太小

 

e. 其它

 

以上为清洁分析方法验证擦拭回收试验中常见的疑问和解答。因指导原则、指南等均仅说了要进行验证以及擦拭回收试验,或者有一些概括性的描述,具体如何合理的做,是没有具体规定或者描述的。所以只有基于风险评估的基础上合理的进行验证。

 

最后,给大家分享一下在验证文件中如何专业、合理的描述棉签供试品处理方法的示例。

棉签供试品处理方法

供试品溶液

精密量取1ml无水乙醇(擦拭溶剂,一定要与取样溶剂相同,才能有效模拟取样效果)至25ml具塞试管中,取一支空白棉签,捻住棉签杆(注意不要接触棉签头的无纺布部分),将棉签用试管里的溶剂充分润湿并在管壁轻轻沥干多余溶剂(保持棉签湿润),使棉签充分接触设备取样点表面,在取样位置上10×10cm2的范围内进行划线(见下图1),先用棉签的一面做平行划线,再以另一面垂直于原方向做平行划线,然后将棉签无纺布一端插入具塞试管口中,用剪刀剪掉手捻过的棉签杆部分后丢弃,在具塞试管中加入稀释剂9ml(稀释剂可以与擦拭溶剂相同,也可以不同),加塞后振摇,超声10分钟,放冷至室温,即得。

清洁分析方法验证中为什么方法回收率合格,而擦拭回收率不合格?

   图1 棉签擦拭示意图

 

参考文献:

药品生产验证指南

ICH Q3C (R6)残留溶剂指导原则

清洁分析方法验证中为什么方法回收率合格,而擦拭回收率不合格?
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