在实验室的日常工作中，移液器是我们最亲密、最常用的“伙伴”之一。数据的准确性与可靠性，很大程度上依赖于移液器的精确性和洁净度。然而，许多实验人员有一个常见的误区：认为移液器的清洁就是简单地用酒精擦拭一下外部表面。

事实上，只清洁表面是远远不够的，甚至是危险的。 真正的污染源和交叉污染风险，往往隐藏在移液器的内部。今天，我们就来彻底讲透移液器清洁与内部灭菌的正确方法。

为什么“只擦表面”是重大误区

移液器的工作原理是通过活塞的上下运动来吸液和放液。在这个过程中，气溶胶、液体微滴甚至倒吸的液体，都会不可避免地进入移液器内部通道和活塞表面。

看不见的污染：即使外部擦拭得光亮如新，内部通道可能已经积累了样品残留、微生物或核酸酶。这些污染物会成为下一次移液的污染源，导致： 样本间交叉污染：严重影响实验结果的准确性，尤其是对PCR、qPCR等超敏感实验可能是毁灭性的。 

微生物污染：在细胞培养、微生物实验中引入杂菌，导致实验失败。

 腐蚀活塞和密封圈：高盐、酸性或有机溶剂残留会加速内部元件的腐蚀和老化，影响移液精度和使用寿命。因此，定期对移液器内部进行彻底的清洁和灭菌，不是“可选项”，而是“必选项”。

移液器内部灭菌的正确步骤

在进行任何操作前，请务必阅读您所用移液器的厂家说明书，因为不同品牌、型号的移液器其耐受性和拆卸方式可能不同。

第一步：准备工作与外部清洁

1、设置工作区：在洁净的台面上进行操作，准备好手套。

2、卸下吸头推出器（如可拆卸）：许多移液器的下半部分套筒可以旋开。

3、外部清洁：用无绒布蘸取适量清水、肥皂水或70%乙醇，仔细擦拭移液器外壁，去除表面的污垢和微生物。避免让液体渗入内部。

第二步：拆卸移液器这是接触内部、进行深度清洁的关键一步。

1、解锁拆卸：参照说明书，通常通过旋转或按压特定卡扣，将移液器下半部（吸头承接器部分）与上半部（机身）分离。

2、取出内部组件：小心地取出活塞、密封圈（O-ring）等核心部件。有些移液器是一体式活塞杆，有些则是分体式。务必轻柔操作，避免划伤精密活塞表面。

第三步：清洁与浸泡

1、清洗：用温和的肥皂水或去离子水冲洗拆卸下来的所有部件（下半部套筒、活塞、密封圈等）。对于顽固污渍，可用软毛刷轻轻刷洗。

2、浸泡灭菌（根据实验需求选择合适方法）：

化学浸泡灭菌（适用所有移液器部件）：

常用消毒剂：75%乙醇、异丙醇、稀漂白液（次氯酸钠，需注意浓度，通常1:10稀释，浸泡后需彻底冲洗以免腐蚀）、专业多酶清洗液。

操作：将拆卸下的所有非金属部件完全浸没在消毒液中，浸泡30分钟以上（具体时间参考消毒剂说明和移液器说明书）。注意：确保所使用的消毒剂与移液器材料相容，避免腐蚀塑料部件。

高温高压灭菌（仅适用于有“autoclavable”标识的移液器）：

准备工作：将移液器拆卸。通常机身（上半部分）不能高温灭菌。只有下半部套筒、活塞杆等部件可以灭菌。务必确认所有要灭菌的部件都耐高温。

包装：将所有可灭菌部件用牛皮纸、灭菌袋或铝箔纸包好，并标注日期。

灭菌参数：通常采用121°C，1 bar (100 kPa)，灭菌20-30分钟。请严格遵守移液器说明书推荐的灭菌时间和温度。切勿过热，否则会损坏部件。

冷却与干燥：灭菌完成后，在无菌环境下取出部件，并务必让其充分冷却和干燥后再进行组装。热部件立即组装会产生水汽，影响密封性和精度。

第四步：重新组装与校准

1、彻底干燥：将所有清洗和灭菌后的部件放在无绒布上完全晾干。确保没有任何液体残留，特别是密封圈区域。

2、涂抹润滑油：根据说明书建议，在活塞上涂抹少量专用的移液器硅脂润滑油。这能保证活塞运动顺滑，保持密封性和延长寿命。切忌使用过多。

3、小心组装：按照反向顺序重新组装所有部件。确保各部位安装到位，卡扣锁紧。

4、性能检查（校准）：经过拆卸和灭菌后，强烈建议对移液器进行精度和准确度的检查（ gravimetric 称重法校准）。这是确保其恢复最佳工作状态的最后、也是最重要的一步。

不同场景下的维护频率建议

日常：每次使用后，用70%乙醇擦拭表面。

常规：每月或每季度进行一次内部清洁（视使用频率而定）。

强制性：

在转换不同样品，特别是涉及DNA、RNA、放射性或腐蚀性样品时。

在进行细胞培养、微生物实验前。

当移液器被液体完全污染或倒吸时（需立即处理！）。

根据实验室质量管理体系（如GLP/GMP）规定的周期。

总结与警示

忌：将整支未拆卸的移液器直接浸泡入消毒液中或进行高温灭菌。

忌：使用腐蚀性强的溶剂（如丙酮、强酸强碱）清洗部件。

忌：在部件未完全干燥时强行组装。

忌：忽略润滑和校准步骤。

移液器是科学家手的延伸，它的“健康”直接关系到实验数据的“生命”。摒弃“只擦表面”的侥幸心理，建立科学、规范的移液器清洁与灭菌流程，是对您实验成果最基本、也是最关键的保障。