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乳制品中活性乳酸菌的检测方法

嘉峪检测网        2017-04-24 14:48

       随着社会的发展,乳制产品的种类也在日益丰富和多样化,如人体所需要的嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜热乳链球菌和保加利亚乳杆菌等也都通常被作为重要成分加入到各种乳产品当中。乳制品被人体摄入之后,其中包含的活性菌也同时进入到人体内部消化系统,它们能够帮助平衡肠胃功能健康,抑制对人体有害的各类细菌繁殖,能够显著提高人的身体健康水平。

       但这种效果不是随便摄入的活性菌就能够起到作用,而是需要摄入人体内的活性菌达到一定的数量才能够有效发挥。经检验表明,人体内部活性菌数量要达到97cfu/ g (m L)以上才能够具有明显效果。实际上,市场上出售的各种乳制品的研究分析发现,大多产品中的包含的乳酸菌的活跃度与浓度都严重偏低,这一方面是由于生产企业不负责任所导致,另一方面也与当缺乏一种行之有效的活性乳酸菌检测方式及其方法有关,因此也不难理解当前市面上为什么存在那么多含超低乳酸菌的乳制品。

 

显微镜下的乳酸菌

 

       当前,对于嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等计数方法已有一些研究文献,但都不是在其纯度较低条件下的计数方法,关于其他菌类计数方面的研究也有学者尝试过,但并没有取得突破性进展。对此,在已有的研究文献的基础上,总结了一种新的非纯度条件下对活性菌计数的方法,能够有效针对嗜酸乳杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌、嗜热乳链球菌和保加利亚乳杆菌进行科学合理的定量分析,为提高奶制品品质提供可靠度科学测量工具。  

 

实验供试菌种:

嗜热乳链球菌( S t r e p t o c o c c u st h e r m o p h i l u s , S T )

保加利亚乳杆菌( L actobacil lus delbr ueckii ssp.bulgaricus,LB)

嗜酸乳杆菌( Lactobacill u s a c i d o p h i l u s , L A)

双歧杆菌( Bif idobacter ia, BB)

干酪乳杆菌(Lactobacillus casei , LC)

 

实验所需仪器:

厌氧培养箱

厌氧培养罐

好氧培养箱

 

实验待检验样品:

1、已知菌样品:

以脱脂乳为培养基,在所需培养条件下分别培养供试的5种菌,即为已知菌待检样品。

2、已知乳品样品:

为市售酸乳或乳酸菌发酵乳饮料,均含有活性乳酸菌,即为已知乳品样品。

 

实验过程分析:

嗜热乳链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌对糖的利用情况:

将M R S琼脂培养基中的葡萄糖分别以柳醇、纤维二糖、果糖、甘露醇、山梨醇等糖类代替,配制成系列不同的M R S琼脂培养基,并制成平板,分别接种ST、LB、LA和BB菌株,在所需条件下培养,观测平板上菌落的生长情况。仅LA可以利用柳醇,故MRS-柳醇琼脂培养基可用于L A的选择计数。当柳醇质量浓度为0. 5%时, LA便可形成大小合适的菌落。另外, M R S-纤维二糖琼脂、MRS-甘露醇琼脂和MRS-山梨醇琼脂也可用于LA的计数。不同培养基平板上ST、LB、LA、BB和LC形成的菌落数检测结果,按照最先进的方法制成十种各不相同的实验培养基,并制成平板,分别接种ST、LB、LA、BB和LC的纯培养菌株,观察检测菌落的形成和数量,并分别做好相关试验数据记录。

 

实验检测结果分析:

s T-琼脂和M17-琼脂适合嗜热乳链球菌的计数

L C-琼脂适合干酪乳杆菌的计数

M R S- N N L P琼脂适合双歧杆菌的计数

MRS- pH5. 2琼脂适合保加利亚乳杆菌的计数

MRS-柳醇琼脂、MRS-山梨醇琼脂、MRS-核糖琼脂和MRS-葡萄糖酸盐琼脂均可用于LA和LC的计数,但因LC-琼脂培养基能抑制LA和BB的生长,从而适宜于L C的选择计数,因此当产品中只有L A和LC存在时,可用LC-琼脂测定LC的菌落数,再用MRS-柳醇琼脂或MRS-山梨醇琼脂或MRS-核糖琼脂或MRS-葡萄糖酸盐琼脂测其总数,两者之差即为L A的数量。对市面上出售的乳制品进行抽样检测,从检测结果分析来看:所选的培养基和培养条件适合对S T、L B、L A和B B的选择计数,对照样品的检测结果接近实际菌数,同时还发现除了对照样品和加LA与BB的酸乳中LA和BB的数量较高外,其它市售酸乳中含的LA和BB菌数均较低。

 

实验结论:

通过实验,对含活性乳酸菌乳制品中不同活性菌的计算方法进行尝试,取得了不错的试验效果。并发现,用R I-琼脂培养基来分离热乳链球菌能够收到显著效果;可用K L-乳酸菌培养基来分离干酪乳杆菌;用NG V-MMWN氨基培养基分离双歧杆菌; N L H-p C7.1碳酸培养基分离和提取保加利亚乳杆菌; NUL-氧脂酸分离和提取嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌;如果1只需要提取和分离嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌,则可在计算其总数量之后,在用N L-碳酸基培养基分离干酪乳杆菌数,剩余即为嗜酸乳杆菌数量。

 

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来源:AnyTesting