对于使用液体固定相的气液色谱柱和毛细管色谱柱来说,都有柱流失的现象,这是由于固定相的正常分解。当发生柱流失时,对检测会有影响,有什么补救措施?
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对于使用液体固定相的气液色谱柱和毛细管色谱柱来说,都有柱流失的现象,这是由于固定相的正常分解而产生的被洗脱物质。柱流失是不可避免的,柱流失程度与固定相种类和色谱柱规格有关,一般固定相的量越多,柱流失则相对较高。柱流失与柱温以及载气中氧气的浓度有关,高温下,固定相的分解会加快。氧气是许多固定相分解的催化剂,特别是在高温时段,强调载气的纯度和色谱柱安装的气密性,一方面就是出于氧气会加剧柱流失的考虑。此外,色谱柱随着使用次数和时间的增加,固定相的稳定性最终也会发生不可逆的变化,导致柱流失的增加。色谱柱柱流失严重情况多出现在进样的溶液类型, SLB-5MS的柱子是非极性的, 当使用极性溶剂时,就会发生反应而导致大量柱流失,在做测试时一定要留意样品的性质。
诊断色谱柱是否存在流失问题的最佳方法是安装色谱柱后,在设定的条件下,做一次空白色谱图,并保存。必要时,将最近的运行和空白运行色谱图对比;如果空白运行中产生了很多峰,则色谱柱性能改变了,如果有GC-MS,则可以通过离子峰的质荷比来判断相应离子是否来自于柱流失。
色谱柱固定相的流失是连续的,一般不会产生一个一个的“流失峰”。绝大多数情况下,我们所观察到的杂峰或鬼峰是来自于色谱柱之外的污染,故障排查可参考以下方法:
1.将进样口温度降至室温, 设置柱箱温度为较低温度如50℃, 恒温约20min, 观察基线;将进样口温度提高到高温, 如250℃, 再在50℃恒温观察20min。如果杂峰信号增加, 说明有来自进样口或载气的污染,可重点检查进样口隔垫和衬管,必要时更换新的。样品瓶隔垫有时也可引入聚硅氧烷类物质的污染,可检查样品瓶里是否有隔垫的碎屑,或比较使用不带隔垫的样品瓶进行排查。
2.检查检测器是否污染。具体步骤是:断开并取下色谱柱,用堵头封住检测器入口。打开检测器,如果继续出现杂峰,则应该立即考虑清洗检测器,并检查检测器所用气体管线的清洁度。
若是色谱图看到有明显的基线波动现象。较高的流失并且基线波动,通常是色谱柱被污染的征兆,样品中的挥发性差的组分可能不在第一次程序升温流出,而在后面的温度循环中缓慢流出,从而导致较高的波动的基线。遇到这种情况,建议维护和更换进样口衬管与隔垫,色谱柱进样口端切割掉0.5-1m,重新安装并在高温老化色谱柱2-3h,观察基线是否恢复正常。