体外细胞毒性测试，是采用细胞培养技术的测试，可用于确定细胞死亡（例如细胞裂解）、细胞生长抑制、集落形成以及由医疗器械、材料或其提取物引起的对细胞的其他影响。

医疗器械生物学评价体系中，体外细胞毒测试是最重要的检测指标之一，通过细胞毒检测可以评价医疗器械和生物材料潜在的体外细胞毒性。在最终用于生物体的组织细胞之前，体外细胞毒性测试作为一个模拟实验，起到预测反应效果的作用。体外细胞毒测试方法经济，简便，可同时进行批量测试，为样品是否进行动物实验室提供了重要筛选材料。

评估指标

在体外细胞毒性测定中使用的众多方法中，根据测量终点可分为以下评估类别：

通过形态学方法评估细胞损伤；

细胞损伤的测量；

细胞生长测量；

测量细胞代谢的特定方面。

解决方案

细胞毒定量测试：MTT测试

原理

这个测试是基于观测细胞代谢活性的方法，MTT是黄色溶于水的试剂，它会被活细胞代谢还原成蓝紫色的甲赞，用异丙醇溶解甲赞后，用分光光度计测量光密度，活细胞的数目同光密度成正比。

参考标准

▪ISO 10993-5:2009 Biological evaluation of medical devices – Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity.

▪ISO 10993-12:2021 Biological evaluation of medical devices – Part 12: Sample preparation and reference materials.

▪GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 – 第5部分：体外细胞毒性试验。

注意事项

实验室测试采样方法一般采用浸提液进行实验，根据标准提供样品的性状及厚度选择合适的浸提比并对样品进行进一步剪切。

细胞毒定性测试：ISO定性法

原理

医疗器械溶出物培养细胞，并用显微镜观察确定细胞的生物学反应。从细胞形态，空泡形成，细胞脱离，细胞溶解情况，及细胞膜完整性等方面评估细胞是否变化，并进行评级。

参考标准

▪ISO 10993-5:2009 Biological evaluation of medical devices – Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity.

▪GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 – 第5部分：体外细胞毒性试验。

细胞毒定性测试：USP定性法

原理

本测试方法测试对象是与病患直接或者间接接触的弹性或聚合材料的溶出物对细胞形态的影响，以确定浸提物的生物学反应

参考标准

USP-NF <87>：BIOLOGICAL REACTIVITY TESTS, IN VITRO: Elution Test.