2022年7月28日，国家卫健委、国家市场监管总局2022年第3号公告发布了GB 4789.2-2022《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》等36项食品安全国家标准和3项修改单。其中食品微生物检测中应用广泛的菌落总数测定方法标准GB 4789.2-2022 （以下简称新标准）已于2022年12月30日起正式实施。
本文就新旧标准的差异专门比较，仅供参考：
一.主要变化如下：
a、细化了一些操作的描述；
b、修改了检样的稀释度要求；
c、修改了培养基的温度；
d、修改了计数判读规则等。
二、标准的具体修改情况对比
1) 修改了设备与材料，由原来温度范围较窄的“恒温水浴箱：46℃±1℃”，改为“恒温装置：48 ℃±2 ℃”。
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GB 4789.2-2022 |
GB 4789.2-2016 |
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3设备和材料：ｃ）、恒温装置：48 ℃±2℃。 |
3设备和材料：3.3恒温水浴箱:46℃±1℃ |
2）修改了培养基和试剂，由原来的“磷酸盐缓冲液”，改为“无菌磷酸盐缓冲液”；增加了“4.2菌落总数测试片：应符合 GB 4789.28 中平板计数琼脂培养基质量控制要求”。
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GB 4789.2-2022 |
GB 4789.2-2016 |
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4 培养基和试剂： |
4 培养基和试剂： |
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无菌磷酸盐缓冲液 |
磷酸盐缓冲液 |
3）规范了标准中的表述，将操作步骤中“磷酸盐缓冲液”修改为“无菌磷酸盐缓冲液”；将“生理盐水”修改为“无菌生理盐水”。
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GB 4789.2-2022 |
GB 4789.2-2016 |
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操作步骤： |
操作步骤： |
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6.1.1：称取25g样品置于盛有225mL无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌均质杯内 |
6.1.1：称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内 |
4）检验程序中“培养”和“计数各平板菌落数”之间增加了时间和温度，使检验程序更 加完整，更加清晰直观。
5）修改了检验程序，将“样品均液”改为“样品匀液”。
6）样品的稀释部分，将“选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液”修改为“1个～3个适宜稀释度的样品匀液”；将“无菌平皿”修改为“无菌培养皿”；将“样品置盛有”修改为“样品置于盛有”，使标准更加通顺严谨。
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GB 4789.2-2022 |
GB 4789.2-2016 |
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操作步骤： |
操作步骤： |
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6.1.1：称取25g样品置于盛有225mL无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌均质杯内 |
6.1.1：称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内 |
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操作步骤： |
操作步骤： |
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6.1.5:根据对样品污染状况的估计,选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌培养皿内,每个稀释度做两个平皿。 |
6.1.5:根据对样品污染状况的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。 |
7）液体样品的稀释部分，增加了“或放入盛有225mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液”，这样稀释部分的选择性更广，实施起来更为方便。
GB 4789.2-2022
GB 4789.2-2016
操作步骤：6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置于盛有225mL无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的
无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，或放入盛有225mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液
操作步骤：
6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1∶10的样品匀液
8）操作步骤中，对样品的混匀设备进行明确的要求，对培养基的温度也进行了调整与扩充，将温度“46℃”改为“48 ℃±2 ℃”。该条款中的“恒温水浴箱”也相应的修改为“恒温装置”。
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GB 4789.2-2022 |
GB 4789.2-2016 |
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操作步骤： |
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操作步骤：6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置于盛有225mL无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的 |
6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1∶10的样品匀液 |
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无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，或放入盛有225mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液 |
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9）将原来的6.2.1和6.2.2合并为“6.2.1 待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃ 培养48h ±2 h。水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h。如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫 生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基，凝固后翻转平板，进行培养。”
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GB 4789.2-2022 |
GB 4789.2-2016 |
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6.2.1 待琼脂凝固后,将平板翻转,36°C±1培养48h±2h。水产品30°C±1°C培养72h±3h。如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,进行培养。 |
6.2.1 待琼脂凝固后,将平板翻转,36°C±1培养48h±2h。水产品30°C±1°C培养72h±3h。 |
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6.2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,按6.2.1条件进行培养。 |
10）“6.2.2 如使用菌落总数测试片,测试片应按照相关技术规程操作。”
11）因6.2.1有防止菌落在琼脂培养基表面弥漫生长的处理，删除了“7.2.3 若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。”
12）增加了“附录B”结果计数示例。
小结
新版标准最大的改变点：
1、稀释度的选择
2016版标准中规定，选“2-3个适宜稀释度的样品匀液”进行检测；新标准2022版中则为选“1-3个适宜稀释度的样品匀液”进行倾注。新标准这样规定，表面看来是更宽松了，可以允许检验者选择1个稀释度进行计数，其实这一规定实际上对检验人员的要求更高了。对于菌落总数检测不出来或者含量极少的可以；但是如果样品中菌落超过300或者更高的话，只做一个稀释度，你能选择到合适的稀释倍数吗？所以，为了检测的严谨性，小编还是建议尽量多做选几个稀释度来计数，以期得出最真实的检验结果。
2、培养基的温度
2016版标准中，指定用“恒温水浴箱”，2022版标准改成了“恒温装置”，这种表述更加宽泛，只要能达到“恒温”的目的就行，不拘泥于水浴箱或其它保温恒温装置。培养基的温度要求从具体的点（46℃）扩展到了一个范围（46℃～50℃），这样得出的结果除了人员操作造成的差异外，温度的差异是不是也会造成检测结果的不同呢？
在实际工作中小编发现，对于一般的水产品制品微生物，46℃倾注计数的结果和48℃倾注计数的结果的确有差异，那么如果再提高到50℃，这种差异是否会更加明显？大家是不是对于这一点也比较疑惑呢？
3、试验操作
对于试验过程中的一些操作，2022版标准进行了更加细化的描述，比如6.1.3中，明确描述为稀释液需要“在振荡器上振荡混匀，制成1∶100的样品匀液”，而不再沿用2016版本中“振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1∶100的样品匀液”的说法。这一描述更加规范，也更加科学。
