抗体的制备、纯化、评价、胶乳偶联技术总结(33页)

  • 抗体的制备、纯化、评价、胶乳偶联技术总结(33页)

    目录

    一、抗体的制备与纯化 5

    (一) 抗体的概念5

    (二) 抗体的本质、结构和类型5

    (三) 抗体的产生5

    (四) 抗体的制备5

    1所需原料 5

    2抗体的制备程序 6

    (五) 单克隆抗体与多克隆抗体的特点与区别7

    (六) 抗体纯化的方法、原理和特点 7

    二、抗体纯化方法简明手册 8

    (一) 盐析法 9

    1主要材料 9

    2影响盐析的因素 10

    3盐的性质 10

    (二) 冷酒精沉淀法10

    (三) Deae-sephadexa-50 柱层析法 11

    (四) SPA-sepharosecl-4b 亲和层析法 12

    (五) 高效和液相色谱 14

    三、TMB 可溶性底物、HRP 酶稳定剂、弗氏佐剂和不完全佐剂的说明书 14

    (一) TMB 可溶性底物(TMBSolubleSubstrate)14

    (二) 辣根过氧化物酶稳定剂(HRPSTABILIZER)  15

    (三) 弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 Freund'sAdjuvant,CompleteandIncomplete  16

    四、抗体保存指南17

    (一) 保存温度和条件 17

    1特别注意:特殊保存条件 17

    2用叠氮化钠防止污染17

    3不使用叠氮化钠的情形 18

    (二) 冷冻/融化损伤  18

    五、不同来源的抗体纯化的方法和注意事项 18

    (一) 不同来源的抗体 18

    1抗血清19

    2组织培养血清19

    3腹水 19

    六、短期免疫抗血清制备及抗体效价检测 19

    (一) 实验一:免疫19

    1实验动物的选择 20

    2实验步骤 20

    (二) 实验二:抽血、放血,分离抗血清20

    1取血 21

    2抗血清的分离,保存21

    (三) 实验三:ELISA 法测定抗体效价21

    1实验材料 22

    2实验步骤 22

    3结果分析 23

    (四) 玻片法—血型鉴定(兴趣实验) 24

    1实验方法和步骤 24

    2实验结果分析24

    七、荧光微球标记抗体方法及问题分析25

    (一) 胶乳大小选择25

    1【求助】免疫胶乳或免疫颗粒(聚苯乙烯)的粒径 - 丁香园论坛 25

    (二) 胶乳标记方法25

    2【交流】蛋白如何偶联到聚苯乙烯乳胶颗粒上 - 丁香园论坛25

    3【求助】胶乳标记 - 丁香园论坛26

    4【求助】抗原或抗体致敏胶乳的缓冲液和 pH 值 - 丁香园论坛 27

    (三) 胶乳标记过程问题 27

    5【求助】胶乳偶联出现絮凝 - 丁香园论坛 28

    八、胶乳标记过程中常见问题集28

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  • 科研开发
  • 2024-02-06
  • 药品与生物制品