导 读

在相关物质分析工作中，杂质重合分不开恼不已。面对这一难题，我们通常会尝试调整分析程序、改变pH值或者更换色谱柱来达成分离目标。然而，有时即便穷尽各种方法，依然无法实现分离，这可能是受限于我们自身的能力，也可能是当前客观条件存在局限。那么，对于这些重合的杂质，是否一定要将其分离呢？

从事这一行业多年的人都知道，在众多标准（无论是国内还是进口的注册标准）中，都存在将某一峰包含两个或多个峰的情况，抗生素类物质尤为常见，多种峰重叠并非意味着是单一组分。实际上，在《中国药典》（ChP）、《美国药典》（USP）以及《欧洲药典》（EP）中，共洗脱是被允许的，但需要解决专属性、准确度（定量）以及安全性（毒理学）等方面的问题（ICH Q2（R2）对此有相关提及）。接下来，我们详细探讨不同情况下重合杂质的具体处理方式。

一、结构相似的杂质

对于结构相似的杂质，尤其是RS 异构体，它们具有相同的原子组成和连接方式，仅在空间构型上存在差异。在常见的分析检测手段中，如紫外- 可见分光光度法（UV - Vis）、高效液相色谱法（HPLC）等，检测信号主要基于分子的电子跃迁、官能团的特性等。由于RS 异构体的结构高度相似，它们在检测过程中产生的信号特征，如吸收波长、保留时间（在色谱分析中）等具有高度一致性。这类杂质可以采取其他手段如旋光等手段来监测，并非要在有关物质这个方法中分离的。

二、结构不相似但为位置异构体

当杂质为位置异构体，且吸收响应相似、毒性接近时，可进行合并计算。不过，在确定限度时，应以单个杂质的限度为准。例如，限度设定为0.1%，而不是将两个杂质重叠在一起按0.2%计算。

三、结构（或不）相似但降解比例稳定

以国内某首研药物为例，其中有两个杂质出现重合现象，但它们的降解比例基本保持稳定。在这种情况下，采用合并计算的方式即可满足分析需求。

四、特定条件下未能分离的重合峰

在有多组分的情况下，由于色谱条件较为苛刻，可能导致两个杂质无法分离。为了确保其他杂质能够获得良好的分离度，有时不得不“牺牲”这两个杂质的分离。比如，其中一个杂质为工艺杂质，另一个为降解杂质，且工艺杂质是原研路线产生的，而自研路线不会产生（或者在原料药后续处理中，该杂质出现的几率极低）。此时，可通过专属性及正交方法进行确认，确保对降解杂质的定量没有影响。

五、物料及中间体的某些异构体

对于物料及中间体中的某些异构体，如果它们不存在安全性问题，那么可以适当放宽分离要求。对于重叠在一起的异构体（无论是位置异构还是RS异构），不一定非要达到分离的目的。但需要根据工艺进行评估，考虑后期是否能够将其清除，以及在传递过程中如何进行监控跟踪。例如，如果物料的RS异构体会一直伴随至产品中，那么就需要对该物料进行严格控制。同时，还要注意重叠时限度是否会超标的风险。

写到最后

杂质合并及合并计算通常基于以下几种情况：有相关标准可供借鉴、定量过程无干扰或者不存在安全性问题。对于仿制药而言，在缺乏相关可查信息的情况下，处理杂质重合往比较麻烦。然而，对于原料药前期的物料及中间体来说，这种处理方式却十分实用。我们不必在分离杂质上耗费过多精力，结合工艺特点对杂质合并进行评估是可行的，无需通过使用更长的色谱柱、采用更苛刻的条件或者延长开发方法周期来强行实现分离目的。

总之，面对杂质重合的问题我们应依据具体情况，综合考虑各种因素，采取科学合理的处理方式，以确保分析工作的准确性和高效性。