摘要

 

目的：

 

建立缬沙坦片溶出度的测定方法。

 

方法：

 

以磷酸盐缓冲液（pH 值6.8）1 000 mL为溶出介质，转速为50 r·min-1，经30 min 时取样，采用紫外-可见分光光度法在250 nm 处测定吸光度，按外标法计算缬沙坦片的溶出度。通过耐用性、滤膜吸附实验、线性与范围、溶液稳定性、精密度试验、重复性试验、回收率试验等试验研究，对缬沙坦片的溶出方法进行验证。

 

结果：

 

该溶出方法学验证结果良好。缬沙坦溶液质量浓度在1.61～17.71 mg·L-1内线性关系良好，回归方程为Y=3.17×10-2x-0.6×10-3，r=0.999 9；方法的回收率、精密度、重复性符合要求，供试溶液在12 h 内稳定。

 

结论：

 

本方法能准确测定缬沙坦片的溶出度，控制缬沙坦片的质量。

 

关键词

 

药剂学；溶出度；浆法；紫外-可见分光光度法；缬沙坦片；验证

 

正文

 

缬沙坦是由瑞士诺华公司开发的降压药，口服药品包括40、80、160、320 mg 四种规格，缬沙坦是一种高选择性Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体（AT1 受体）拮抗剂，具有良好的抗高血压作用，其通过对肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAS）特异性阻断达到控制血压的效果，其降血压疗效和耐受性已在多个临床试验中得到证明[1-2]。

 

口服固体制剂的溶出行为的考察是评价药品质量的重要标准[3-4]。在仿制药研发中，溶出度试验为处方及工艺的开发提供方向，也是预测仿制药生物等效性的有效手段，还是评价药品质量稳定性的重要手段之一[5]。

 

由于缬沙坦在水中溶解度小，溶出是限制其体内吸收的主要过程，所以建立溶出度的测定方法，使其准确反映产品质量，有利于控制和提高缬沙坦仿制药质量，提升其体内生物等效性试验的成功率。

 

作者主要对160 mg 规格产品进行溶出度的方法学研究，评价产品的质量。

 

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1 仪器与材料

 

UV2300 紫外-可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司），RC8MD 溶出仪（天大天发科技有限公司），XSE205 电子天平、FE-20 pH 计（梅特勒-托利多仪器有限公司）。

 

缬沙坦片（规格160 mg，华北制药股份有限公司，批号XS1405001、XS1405002、ZS1405003)，缬沙坦对照品,（中国药品生物制品检定所，批号100651-201203)，缬沙坦参比制剂(规格160 mg，瑞士诺华制药有限公司，批号B8292YX)。

 

磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氢氧化钠（分析纯，北京化工厂），水为纯化水（华北制药股份有限公司）。

 

2 方法与结果

 

2.1 溶出度方法的确定

 

缬沙坦片收载于《中华人民共和国药典》2015 年版二部及《美国药典》USP39 版[6-9]中，两者规定的溶出度检测方法均为以磷酸盐缓冲液（pH 值6.8）1 000 mL 为溶出介质，转速为50 r·min-1，经30 min 时取样，照紫外分光光度法在250 nm 处测定吸光度，按外标法计算溶出度[8-9]。

 

可见，该方法为大家所公认，所以缬沙坦片的溶出度研究仍采用该方法。

 

2.1.1 溶出介质的制备

 

pH 值6.8 磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾3.60 g 和磷酸氢二钾三水合物5.37 g，加水适量振摇使溶解，加水稀释至1 000 mL，摇匀，即得。

 

2.1.2 对照溶液的制备

 

取缬沙坦对照品适量，精密称定，加溶出介质溶解并制成每1 mL 中约含16 μg 的溶液。

 

2.1.3 供试溶液的制备

 

取溶出介质1 000 mL，置于溶出杯中，共6 杯。

 

设定温度为37 ℃，开启仪器。取供试品6 片，分别投入6 个溶出杯中，转速为50 r·min-1，启动仪器，计时，经30 min 取样，取样体积为5 mL，立即过滤，精密量取澄清滤液适量，用溶出介质稀释制成每1 mL 约含缬沙坦16 μg的溶液，即得。

 

2.1.4 测定方法

 

照紫外-可见分光光度法，在250 nm 处测定供试与对照溶液的吸光度，按照外标法以吸光度计算溶出度。

 

2.1.5 结果判定

 

计算每片的溶出量，限度为标示量的80%。

 

2.2 溶出度的检测方法研究

 

2.2.1 线性关系考察

 

取缬沙坦对照品约8 mg，置于250 mL 量瓶中，用pH 值6.8 磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照储备液；精密量取对照品储备液1、2、4、6、8、10 和11 mL，分别置于20 mL量瓶中，加pH 值6.8 磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为线性溶液。

 

缬沙坦溶液质量浓度在1.61～17.71 mg·L-1 内线性关系良好，回归方程为Y=3.17×10-2x-0.6×10-3，r=0.9999，Y 轴截距为100%响应值的0.012%，不大于2.0%，响应因子的RSD 值为1.8%，不大于2.0%，结果见表1。

 

 

2.2.2 精密度试验

 

按“2.1.2”条配制1 份缬沙坦对照溶液，连续测定6 次，吸光度的相对标准偏差为0.11%，说明精密度良好，结果见表2。

 

 

2.2.3 滤膜吸附试验

 

取溶出液适量，分别采用过滤和离心的方式进行处理后测定吸光度，计算溶出度。取溶出液适量，采用转速为4 000 r·min 离心5 min，取上清液用溶出介质稀释成每1 mL 约含缬沙坦16 μg的溶液，作为高速离心法制备溶液。

 

另取溶出液适量，经0.45 μm 滤膜滤过，取续滤液适量，用溶出介质稀释成每1 mL 约含缬沙坦16 μg 的溶液作为滤膜过滤液，照紫外-可见分光光度法，在250 nm 处测定供试溶液与对照溶液的吸光度。

 

过滤法和高速离心法结果基本一致，说明滤膜对本品无吸附，结果见表3。

 

 

2.2.4 回收率试验

 

配制限度浓度（16 mg·L-1）的50%、80%和110%的供试溶液各3 份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。称取混合空白辅料16 mg，共9 份，分别置于1 000 mL 量瓶中，分成3 组，每组3 份，称取缬沙坦对照品约8.0、12.8 和17.6 mg 各3 份，精密称定，分别置上述1 000 mL 量瓶中，加pH 值6.8 磷酸盐缓冲液溶解，过滤。

 

照紫外-可见分光光度法，在250 nm处测定吸光度。本品平均回收率为99.6%，结果在98.0%～102.0%之间，9 个回收率数据的相对标准差（RSD）为0.6，小于2.0%，说明本法回收率良好，准确度高，结果见表4。

 

 

2.2.5 稳定性试验

 

取供试品适量，以pH 值6.8 磷酸盐缓冲液1 000 mL 为溶出介质，转速为50 r·min-1，依法操作，经30 min 时，取溶液适量，滤过，滤液于室温条件下放置，于0、1、2、4、6、10 和12 h精密量取滤液适量，用溶出介质稀释制成每1 mL 含16 μg 的溶液后取样测定。照紫外-可见分光光度法，在250 nm 处测定吸光度。

 

结果供试溶液室温放置的吸光度的RSD 值为0.22%，不大于2.0%。说明此溶液在室温条件下12 h 内稳定，结果见表5。

 

 

2.2.6 重复性试验

 

取样品6 片，按照“2.1”条中的溶出度方法测定，每杯样品分别取样6 次，分别过滤测定，各片样品溶出度6 次测定结果的相对标准偏差均不大于2.0%，说明方法重复性良好，结果见表6。

 

 

2.2.7 中间精密度试验

 

由不同分析人员，不同时间使用不同的仪器对同一批样品进行测试，样品溶出度平均结果的偏差不大于5.0%，说明方法中间精密度良好，结果见表7。

 

 

2.2.8 耐用性试验

 

2.2.8.1 溶出条件的耐受性试验

 

考察溶出介质体积的变化约±5%，溶出温度变化±0.5 ℃、转速相对值变化±5 r·min-1，进行测定时溶出度的变化情况。

 

耐用性各条件项下的溶出数据的RSD 值为0.42%，小于2.0%，耐用性良好，结果见表8。

 

 

2.2.8.2 检测波长的耐用性试验

 

改变本品的检测波长（250±2）nm，照紫外-可见分光光度法进行测定，耐用性各条件项下的溶出数据的RSD 值为0.185%，小于2.0%，耐用性良好，结果见表9。

 

 

2.2.9 溶出均一性试验

 

取自制样品（批号XS1405001）6 片，根据“2.1”条中的溶出度方法，分别在5、10、15、20、30 和45 min 取样，测定各样品的溶出曲线，确定其溶出均一性。样品在各个时间点的溶出RSD 分别为1.8%、1.1%、1.0%、0.94%、0.93%和0.81%，测定结果见表10。

 

 

结果表明，在pH值6.8 介质中的本品溶出批内均一性良好。

 

2.2.10 溶出重现性试验

 

取中试样品XS1405001、ZS1405002、ZS1405003 三批次供试品及上市品B8292YX，每批取6 片，于5、10、15、20、30 和45 min 时吸取溶出液适量，测定溶出量，结果表明产品溶出重现性良好，与上市品相似。

 

 

3  结论

 

在《中华人民共和国药典》2015 年版二部及《美国药典》USP39 中，缬沙坦片均采用紫外可见分光光度法测定溶出度。

 

作者根据两药典规定的溶出条件，采用紫外分光光度法建立了缬沙坦片溶出度的体外分析方法，并系统的进行了方法学研究，验证结果表明，该方法专属性、线性、重复性、准确度、耐用性均符合要求，为体外溶出度的检测提供科学合理的试验方法。

 

参考文献

 

详见 中国药剂学杂志 2019 年9 月第17 卷 第5 期